在病理外檢工作中常規(guī)石蠟切片及染色的質(zhì)量是保證病理診斷及時(shí)、準(zhǔn)確的關(guān)鍵。我們在從事病理組織學(xué)制片和對病理組織切片的會(huì)診中常常發(fā)現(xiàn)，由于切片和染色質(zhì)量不佳，難以做出準(zhǔn)確的病理診斷甚至出現(xiàn)錯(cuò)誤的診斷結(jié)論。多年來，我們在病理組織制片技術(shù)上積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。現(xiàn)將臨床病理制片中常見的問題及解決的辦法總結(jié)如下。
1切片不完整或切片困難
1.1實(shí)質(zhì)性器官，如淋巴結(jié)、肝、脾組織細(xì)胞豐富，細(xì)胞間纖維組織含量少，脫水透明時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞嚴(yán)重脫水；浸蠟溫度過高導(dǎo)致組織收縮變硬變脆，使制片不完整形成破碎。
1.2纖維瘤，脂肪結(jié)締組織等取材過厚，有時(shí)未將小淋巴結(jié)剖成切面，淋巴結(jié)纖維組織膜阻止了脫水透明和浸蠟試劑與組織內(nèi)部的滲透交換，導(dǎo)致組織脫水不徹底、石蠟不易浸透、組織過軟，切片困難。
1.3處理方法根據(jù)組織來源將標(biāo)本分為大小兩類，分別進(jìn)行脫水、透明、浸蠟，避免組織過硬或過軟。
(1)胃、腸、子宮等大標(biāo)本，取材后固定脫水、透明時(shí)間和浸蠟時(shí)間均不少于10 h。
(2)胃、支氣管、宮頸內(nèi)膜等小標(biāo)本脫水透明浸蠟一般6 h完成。取材厚度小于0.2 cm的淋巴結(jié)、甲狀腺按小標(biāo)本處理。
(3)如出現(xiàn)組織過硬無法制片，可將蠟塊放到95%乙醇甘油1∶1混合液中軟化再行切片。出現(xiàn)組織過軟，將蠟塊重新浸蠟后包埋切片。
(4)新鮮組織及時(shí)固定。脫水、透明試劑要保持最后一缸的純度。浸蠟溫度不超過65℃，包埋用蠟溫度應(yīng)高于浸蠟溫度。夏季氣溫高可用熔點(diǎn)60～62℃切片石蠟；冬天氣溫低，可用56～58℃切片石蠟。
2切片皺縮、折疊、破碎、裂紋
2.1刀鋒變鈍、刀鋒上粘有蠟屑、切片刀角度太小、組織浸蠟時(shí)間不夠，切片時(shí)組織會(huì)被皺縮在一起。
2.2漂片水溫過高，如淋巴結(jié)、腦組織及含黏液成分較多的組織切片，放到過高水溫中未及時(shí)展片，就易粘在一起形成折疊，還可能將含脂肪的組織燙碎。
2.3 切片刀有小缺口，組織中有鈣化、異物、包埋蠟溫過低、蠟塊中出現(xiàn)小白點(diǎn)等，都可造成切片的裂紋。
2.4處理方法
(1)注意檢查刀具，及時(shí)移換刀口，及時(shí)磨刀，保持刀的鋒利，注意切片刀的清潔并及時(shí)清除刀和蠟塊上的蠟屑，防止切片的污染。
(2)調(diào)整好刀與蠟塊的角度，雙平面刀傾斜角為12～15度。
(3)包埋組織及修蠟塊應(yīng)完全，組織周圍應(yīng)留有0.2 cm余蠟。
(4)用酒精燈加溫漂片，水溫應(yīng)控制在45～50℃之間。
(5)取材時(shí)避免組織中鈣化、線頭及異物。
3切片脫落
3.1組織內(nèi)含過多的壞死物，細(xì)胞崩解后，有形成分減少，附著力下降，局部的滲透壓升高，吸收水分，切片一經(jīng)固定水分逸出，壞死物質(zhì)失去細(xì)胞的支撐作用，染色時(shí)組織易脫落。
3.2漂片水溫過低，切片的微細(xì)皺折未展平，造成與載片附貼不牢固。
3.3烤片溫度低時(shí)間短，載片不干凈，切片太厚放置室溫太久都能造成切片脫落。
3.4處理辦法取材時(shí)避免組織內(nèi)帶有壞死組織，調(diào)整好漂片水溫，烤片溫度在65℃不少于30 min，保持載片清潔，防止灰塵污染。切片厚度應(yīng)在4 μm。
4切片厚薄不均，切片上有橫紋
4.1切片機(jī)微動(dòng)部分失靈，齒輪跳格。
4.2切片機(jī)上的組織塊夾持器或夾刀螺絲未旋緊，刀的斜度太大或太小。
4.3蠟塊太硬過大，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)刀刃受到震動(dòng)。
4.4切片時(shí)用力、速度不均勻。
5切片染色對比不佳及染色污染
5.1切片脫蠟不徹底，細(xì)胞不易著色；切片過厚導(dǎo)致細(xì)胞重疊；蘇木素染色時(shí)間過長，分化時(shí)間不夠，胞核著色深，核仁分辨不清。
5.2表面有氧化金屬膜的蘇木素染液易污染切片，其染液使用超過半年以上，成分及濃度都發(fā)生了變化，染色力下降，延長時(shí)間易造成核漿共染。
5.3處理辦法脫蠟入水后切片成云霧狀，應(yīng)延長脫蠟時(shí)間或更換脫蠟用試劑。分化后肉眼觀查切片呈淡藍(lán)色為良好。新配蘇木素易產(chǎn)生氧化金屬膜應(yīng)及時(shí)過濾。蘇木素染色超過5 min，染色效果不佳應(yīng)及時(shí)更換。
