根據臨床癥狀和病理剖檢變化，結合流行病學分析可做出初步診斷，查出病原菌才具有確診意義。
以無菌操作法采取病死雞皮下滲出液、關節腔滲出液或雛雞卵黃囊，以及內臟器官如肝、脾、腎可作為金黃色葡萄球菌分離培養的病料。接種培養基，同時涂片、染色鏡檢。如果從典型的病灶中分離到革蘭氏陽性單在或排列成短鏈狀球菌，可作為快速的初步鑒定。
金黃色葡萄球菌在普通瓊脂和血液瓊脂（綿羊血或牛血）上生長良好，對于污染嚴重的病料，可以用高鹽培養基，如甘露醇－高鹽瓊脂培養基，以抑制革蘭氏陰性細菌的生長。根據在固體培養基上典型的菌落形態、色素產生情況、溶血情況，鏡檢時典型的葡萄串狀的排列方式，很容易確診為金黃色葡萄球菌。
由于葡萄球菌常常是健康正常禽菌群的一部分，所以僅僅分離出葡萄球菌的本身并不能作為葡萄球菌病完全的診斷證據，還需做致病性和非致病性葡萄球菌的區別。一般致病性葡萄球菌血漿凝固酶試驗陽性，產生金黃色色素，在血液瓊脂上呈β-型溶血，發酵甘露糖，而非致病性葡萄球菌上述幾項試驗為陰性。
近幾年來有利用PCR技術、核酸探針、ELISA方法等檢測葡萄球菌的毒素基因和抗原物質。這些方法特異性強、靈敏度高，但需一定設備條件才能推廣應用。
以無菌操作法采取病死雞皮下滲出液、關節腔滲出液或雛雞卵黃囊，以及內臟器官如肝、脾、腎可作為金黃色葡萄球菌分離培養的病料。接種培養基，同時涂片、染色鏡檢。如果從典型的病灶中分離到革蘭氏陽性單在或排列成短鏈狀球菌，可作為快速的初步鑒定。
金黃色葡萄球菌在普通瓊脂和血液瓊脂（綿羊血或牛血）上生長良好，對于污染嚴重的病料，可以用高鹽培養基，如甘露醇－高鹽瓊脂培養基，以抑制革蘭氏陰性細菌的生長。根據在固體培養基上典型的菌落形態、色素產生情況、溶血情況，鏡檢時典型的葡萄串狀的排列方式，很容易確診為金黃色葡萄球菌。
由于葡萄球菌常常是健康正常禽菌群的一部分，所以僅僅分離出葡萄球菌的本身并不能作為葡萄球菌病完全的診斷證據，還需做致病性和非致病性葡萄球菌的區別。一般致病性葡萄球菌血漿凝固酶試驗陽性，產生金黃色色素，在血液瓊脂上呈β-型溶血，發酵甘露糖，而非致病性葡萄球菌上述幾項試驗為陰性。
近幾年來有利用PCR技術、核酸探針、ELISA方法等檢測葡萄球菌的毒素基因和抗原物質。這些方法特異性強、靈敏度高，但需一定設備條件才能推廣應用。
