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豬藍耳病概述和病原介紹

   日期:2016-03-05     來源:聚農網    作者:jn720.com    瀏覽:259    
 豬繁殖與呼吸綜合征,又稱“豬藍耳病”,是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒( PRRSV)引起豬的一種繁殖障礙和呼吸道炎癥的傳染病。其臨床癥狀特征為厭食、發熱、母豬繁殖障礙,懷孕期發生大批流產,產死胎和木乃伊胎;仔豬與育成豬發生嚴重呼吸道癥狀疾患及高死亡率。本病于1987年首先發現于美國,1990年出現于德國并散布至其他國家,病毒主要通過鼻、眼分泌物、胎兒及子宮分泌物甚至公豬的精液排出,感染健康豬只,侵害豬的巨噬細胞,極易感染并損傷免疫器官致使機體免疫功能降低,使患病豬極易繼發各種疾病。本病主要傳播途徑是接觸感染,空氣傳播和精液傳播,無季節性,一年四季均可發生。

豬繁殖與呼吸綜合征病毒( PRRSV)屬于動脈炎病毒科( Arteriviridae),動脈炎病毒屬( Arterivirus)成員。 1991年荷蘭中央獸醫研究中心,率先從人工和自然感染病豬分離到病毒,命名Lelvstad病毒(LV)。美國分離株稱為VR-2332

 

形態結構

病毒粒子呈卵圓形,直徑50-65nm。在感染的肺泡巨噬細胞的超薄切片中,PRRSV直徑為4565nm的球狀顆粒,核衣殼直徑30-50nm,衣殼上有5nm短突起。病毒在氯化銫中的浮密度為1.19gmL,在蔗糖中的浮密度1.14g/mL。該病毒有囊膜、二十面體對稱,為單股正鏈不分節段、聚腺苷酸化RNA病毒。基因組長15432b,包括8個開放閱架框架(ORFs,ORF-7編碼的核衣殼蛋白、ORF5編碼的囊膜蛋白、ORF6編碼的膜蛋白,以及ORF2ORF3ORF4編碼的蛋白產物起反應,它們都很容易檢測。每個閱讀框和相鄰的有部分重疊,ORF1編碼病毒的復制酶,包括ORFlaORFlb,位于基因組的5’端。其上游是長約189個核苷酸的5’端非編碼區( Non-codingregion,NCR),高度保守。在兩種血清型毒株中,5’端非編碼區的同源性高達99%。在緊接ORFla起始密碼子的前導序列中有兩個發夾結構。ORF1是最大的一個閱讀框,長約12kb.約占基因組的80%oORFlaORFlb重疊16個核苷酸,在重疊序列中有庚核苷酸結構和擬節結構,這兩種結構均是聚合酶翻譯過程中核糖體移碼所必需的。ORF2-7是病毒基因組的結構基因,主要編碼病毒的結構蛋白,包括病毒囊膜蛋白( GPs)、基質蛋白(M)和核衣殼蛋白(N)。在ORF7終止密碼子之后是3’端非編碼區(NCR),含有polyA結構,其長度在14-23個核苷酸之間(平均長度為17個核苷酸)。在polyA上游有一個高度保守的八核苷酸序列。3'NCR在兩種血清型毒株中的同源性為76%。認為這段序列的功能可能是聚合酶的結合區,用以啟動負鏈RNA的合成。

PRRSV的分類

PRRSV分為兩個型,即以ATCCVR-2332毒株為代表的美洲型和LelystadvirusLV株)為代表的歐洲型。 PRRSV具有變異性,歐洲和美洲分離毒株之間存在顯著的抗原差異性,兩者只有很少的交叉反應。序列分析表明北美兩地區的分離株存在廣泛的基因組變異,而歐洲毒株之間則呈較為保守性。不同毒株之間在毒力和致病力上有明顯的差異。我國的PRRSV分離毒株均屬美洲型,迄今還沒有發現歐洲型毒株。

PRRSV與所有的RNA病毒一樣,具有高度的變株也存在變異現象,現已發現有缺失變異毒株的存在,例如我國當前新出現的高致病性藍耳病病毒;就是一個典型例證。

PRRSV的生長要求較高,PRRSV專嗜在豬肺泡巨噬細胞(PAM)內生長,在傳代細胞系CL2621Marc1451中亦可生長繁殖,且可產生明顯的細胞病變;目前只有在豬原代肺泡巨噬細胞(PAM)、猴腎細胞C L2621細胞、MA104系的克隆株MARC-145細胞上生長良好,可用于PRRSV的分離與鑒定。據報道不同病毒株適合生長在不同的細胞上,有的毒株僅生長在一種細胞上,有的毒株生長在多種細胞上。PAM對大多數PRRSV毒株都適應,且產毒量高,但因PAM制備的技術難度較大、難以獲得均質的PAM等問題,應用受到一定限制。目前,大多用MARC-145細胞分離培PRRSV

在這些細胞系上均能產生明顯的細胞病變(CPE)。歐洲LV株在PAM生長較好,而在其他細胞系上培養則毒價很低,而美洲株在所有細胞系上生長都較好。

歐洲和美國分離的毒株在形態和理化性狀上相似。但血清學試驗、核苷酸和氨基酸序列分析,證實歐洲LV株和美國分離株VR-2332在抗原性上有差異。歐洲分離(LV)僅能適應于豬肺巨噬細胞,并能產生細胞病變(CPE),美國分離株(VR-2332)可在CL2621MarC-145MA-104細胞系培養,并能出現CPE 。因此,將PRRSV分為兩個亞群,A亞群為歐洲原型;B亞群為美國原型。

根據基因的變異程度,目前將PRRSV分為2個不同的地理群:以歐洲原型病毒Lelystad vlrus(簡稱LV)為代表的A群和以美國原型病毒ATCCV R-2332株為代表的B群。血清學試驗結果表明不同的分離株之間有共同的抗原決定簇,屬一種病毒3但兩者抗原性差異使其在血清學反應中僅有很少的交叉反應。核酸序列比較也表明它們的基因組中存在廣泛的差異。兩群病毒的抗原差異可大到只有應用同一種抗原型的病毒進行血清學試驗才能確診PRRSV。即使在同一群內不同毒株之間也存在著毒力及抗原性的差異。PRRSV3種主要結構蛋白為:分子質量為15kD的核衣殼蛋白(N)1 8k d的基質蛋白(M)25kD的囊膜蛋白(E)。其中N蛋白免疫原性最強,在PRRSV感染豬體時,所有感染豬在攻毒后7d都能檢測到抗N抗體。

 

抵抗力

病毒對乙醚和氯仿敏感,在pH6.5-7.5穩定。PRRSV不凝集紅細胞,無血凝活性不凝集雞、鵝、豚鼠、牛、馬、豬、綿羊和人的紅細胞。病毒經乙醚和吐溫-80處理后具有血凝活性,且能被PRRSV特異性抗血清抑制。PRRSVpH值及溫度變化非常敏感;pH值大于7或小于5時其感染性降低90%以上,對堿耐受性極差,pH5.5 - 6.6為其保存最適pH值;室溫及37℃以下迅速失活,5645min即被完全滅活;在-70℃可保存1 8個月,4℃保存1個月,3748h5645min完全失去感染力。在血漿中的存活時間不超過5天,pH值高于7或低于5時,感染力可以減少90%以上。發病豬場的豬出場后,3周內仍具有感染力。對消毒劑抵抗力不強。利用這些特點可選用合適的消毒劑或熱水清潔環境。

 

生物學特性

PRRSV上的囊膜蛋白GP5是病毒的主要結構蛋白和免疫保護性抗原之一,有許多獨特的生物學和免疫學功能,在致病和免疫機制中發揮著重要作用。PRRSV有許多不同的毒株,不同毒株間的抗原性和致病性存在明顯的差別。PRRSV比較獨特之處是,即使抗體試驗結果陽性也不表示具有免疫力。具有高抗體滴度的豬仍可大量排出病毒。

PRRSV另一個重要的生物學特征為抗體依賴性增強(ADE)作用,即在低水平“亞中和”的PRRSV特異性抗體存在的情況下,PRRSV在細胞上的復制能力增強。PRRSV的這種抗體依賴性增強(ADE)現象在體內和體外均得到證實。PRRSV具嚴格的宿主專一性,家豬是其唯一的天然宿主,此外,某些禽類也可人工感染。

 
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